在2007年由國家發(fā)展和改革委員會(huì)發(fā)布了《抗菌涂料》HG/T 3950-2007行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)來規(guī)范抗菌涂料的要求，于2008年1月1日正式被實(shí)施。下面我們一起來了解一下這份標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范到底制定了哪些內(nèi)容?
中華人民共和國化工行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)
抗菌涂料
Antibacterial coating
《HG/T 3950-2007》
2007-07-20發(fā)布 2008-01-01實(shí)施
中華人民共和國國家發(fā)展和改革委員會(huì)
發(fā)布
前言
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了抗菌涂料的抗細(xì)菌性能、抗霉菌性能以及對(duì)抗菌效果的評(píng)價(jià)方法，還規(guī)定了抗菌耐久性及壽命評(píng)價(jià)方法。本標(biāo)準(zhǔn)的抗菌性能要求和試驗(yàn)方法參考日本國家工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)JIS Z2801一2000《抗細(xì)菌加工制品一一抗細(xì)菌性試驗(yàn)方法和抗細(xì)菌效果》。
本標(biāo)準(zhǔn)的附錄 A附錄B為規(guī)范性附錄
本標(biāo)準(zhǔn)由中國石油和化學(xué)工業(yè)協(xié)會(huì)提出。
本標(biāo)準(zhǔn)由全國涂料和顏料標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。
本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國建筑材料科學(xué)研究總院、中國化工建設(shè)總公司常州涂料化工研究院、深圳方浩實(shí)業(yè)有限公司、立邦涂料(中國)有限公司深圳市海川實(shí)業(yè)股份有限公司、廣東省微生物分析檢測中心、中國疾病預(yù)防控制中心、北京富亞涂料有限公司、廣東美涂士化工有限公司內(nèi)門太古油(中國)有限公司、奧麒化工有限公司上海富臣化工有限公司北京星牌建材有限責(zé)任公司海虹老人牌涂料(深圳)有限公司江蘇晨光涂料有限公司江蘇常泰料有限公司國哈利本化學(xué)有限公司。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：王靜、冀志江、陳延?xùn)|、趙玲、段質(zhì)美、陳儀本、陳西平、李霞、蔣和平、肖波勇、許鈞強(qiáng)、熊榮、董慶光、葉榮森、劉小健、喬亞玲、林丹、繆國元、吳金龍、于占鋒、王繼梅、丁楠。
1、范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了建筑和木器用抗菌涂料的術(shù)語、定義、產(chǎn)品分類、技術(shù)要求、檢測方法、檢驗(yàn)規(guī)則、標(biāo)志、包裝和貯存。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于具有抗菌功能的建筑用涂料和木器用涂料，其他涂料可參照使用。
2、規(guī)范性引用文件
下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件其隨后所有的修改單(不包括勘誤內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn),然而,勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。
GB/T1250 極限數(shù)值的表示方法和判定方法
GB/T 3186 色漆清漆和色漆與清漆用原材料一取樣(GB/T 3186-2006.idt ISO 15528：2000)
GB 4789.2 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測定
GB/T 9750 涂料產(chǎn)品包裝標(biāo)志
GB/T 9756 合成樹脂乳液內(nèi)墻涂料
GB/T 13491 涂料產(chǎn)品包裝通則
GB 18581 室內(nèi)裝飾裝修材料溶劑型木器涂料中有害物質(zhì)限量
GB 18582 室內(nèi)裝飾裝修材料內(nèi)墻涂料中有害物質(zhì)限量
GB 19258 紫外線殺菌燈
GB 19489 實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求
3、術(shù)語和定義
3.1
抑菌bacteriostasis
抑制細(xì)菌、真菌、菌等微生物生長繁殖的作用叫做抑菌。
3.2
殺菌sterilization
殺死細(xì)菌、真菌、霉菌等微生物營養(yǎng)體和繁殖體的作用叫做殺菌。
33
抗菌antibacterial
抑菌和殺菌作用的總稱為抗菌。
3.4
抗菌涂料 antibacterial coating
具有抗菌作用的涂料稱為抗菌涂料。
4、產(chǎn)品分級(jí)
按抗菌效果的程度,抗蔭涂料分為兩個(gè)等級(jí)Ⅰ級(jí)和Ⅱ級(jí)。Ⅰ級(jí)適用于抗菌性能要求高的場所，Ⅱ級(jí)適用于有抗菌性能要求的場所。
5、技術(shù)要求
5.1 抗菌涂料的常規(guī)性能:應(yīng)符合相關(guān)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的技術(shù)要求。
5.2 抗菌涂料的有害物質(zhì)限量：合成樹脂乳液水性內(nèi)用抗菌涂料應(yīng)符合 GB 18582 中技術(shù)要求規(guī)定，溶劑型木器抗菌涂料應(yīng)符合 GB 18581中技術(shù)要求規(guī)定。
5.3 抗菌涂料的抗菌性能應(yīng)符合表1表2規(guī)定。
6 試驗(yàn)方法
6.1 取樣
產(chǎn)品按 GB/T 3186 的規(guī)定進(jìn)行取樣。樣品分為兩份：一份密封保存;另一份作為檢驗(yàn)用樣品。
6.2 抗菌涂料的物理性能
按相關(guān)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的檢驗(yàn)方法進(jìn)行檢驗(yàn)。
6.3 抗菌涂料的有害物質(zhì)含量
按 GB 18582 或GB 18581 中試驗(yàn)方法的規(guī)定進(jìn)行抗菌涂料有害物質(zhì)限量檢驗(yàn)抗細(xì)菌性能試驗(yàn)。
6.4 抗細(xì)菌性能試驗(yàn)
按附錄 A規(guī)定的方法進(jìn)行試驗(yàn)。從事抗菌試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)符和 GB 19489 規(guī)定的實(shí)驗(yàn)室生物安全管理和設(shè)施條件要求。
6.5 抗霉菌性能試驗(yàn)
按照附錄 B規(guī)定的方法進(jìn)行試驗(yàn)。從事抗霉菌試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)符合 GB 19489 規(guī)定的實(shí)驗(yàn)室生物安全管理和設(shè)施條件要求。
6.6抗菌耐久性能試驗(yàn)
采用1支 30 W、波長為 253.7nm 的紫外燈,紫外燈符合 GB 19258.抗菌涂料試板距離紫外燈0.8m~10m，照射 100h,經(jīng)處理后的試板抗菌性能按附錄A 附錄B方法進(jìn)行試驗(yàn)。
7 檢驗(yàn)規(guī)則
7.1 檢驗(yàn)分類
產(chǎn)品檢驗(yàn)分出廣檢驗(yàn)和型式檢驗(yàn)。
7.1.1 出廠檢驗(yàn)項(xiàng)目按照相關(guān)涂料產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的出廠檢驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行。
7.1.2 型式檢驗(yàn)項(xiàng)目包括本標(biāo)準(zhǔn)所列的全部技術(shù)要求。
7.1.2.1 正常生產(chǎn)情況下,每半年至少進(jìn)行一次型式檢驗(yàn)。
7.1.2.2 有下列情況之一時(shí),應(yīng)進(jìn)行型式檢驗(yàn):
a)產(chǎn)品試生產(chǎn)定型鑒定時(shí)。
b)產(chǎn)品主要原材料及用量或生產(chǎn)工藝有重大變更時(shí)。
c)停產(chǎn)半年以上又恢復(fù)生產(chǎn)時(shí)。
d)國家技術(shù)監(jiān)督機(jī)構(gòu)提出型式檢驗(yàn)時(shí)。
7.2 檢驗(yàn)結(jié)果的判定
7.2.1 檢驗(yàn)結(jié)果的判定按 GB/T 1250中修約值比較法進(jìn)行。
7.2.2 抗細(xì)菌性能和抗霉菌性能 4 項(xiàng)指標(biāo)均達(dá)到Ⅰ級(jí)時(shí)，該抗菌涂料樣品可判為Ⅰ級(jí)，其中有 1項(xiàng)不符合即判為Ⅱ級(jí)。
7.2.3 抗細(xì)菌性能和抗霉菌性能 4 個(gè)項(xiàng)目的檢驗(yàn)結(jié)果均達(dá)到本標(biāo)準(zhǔn)要求時(shí)該產(chǎn)品為符合標(biāo)準(zhǔn)要求。如有一項(xiàng)檢驗(yàn)結(jié)果未達(dá)到本標(biāo)準(zhǔn)要求時(shí)，應(yīng)對(duì)保存樣品進(jìn)行復(fù)驗(yàn),如復(fù)驗(yàn)結(jié)果仍未達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)要求時(shí),該產(chǎn)品為不符合本標(biāo)準(zhǔn)要求。
8、標(biāo)志、包裝和貯存
8.1 標(biāo)志
8.1.1 產(chǎn)品包裝標(biāo)志除應(yīng)符合 GB/T 750 的規(guī)定外按本標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)合格的產(chǎn)品可在包裝標(biāo)志上明示
8.1.2 對(duì)于由雙組分或多組分配套組成的涂料,包裝標(biāo)志上應(yīng)明確各組分配比。對(duì)于施工時(shí)需要稀釋的涂料,包裝標(biāo)志上應(yīng)明確稀釋比例。
8.2 包裝
按 GB/T 13491 中各級(jí)包裝要求的規(guī)定進(jìn)行。
8.3 貯存
產(chǎn)品貯存時(shí)應(yīng)保證通風(fēng)干燥,防止日光直接照射,水性抗菌涂料冬季時(shí)應(yīng)采取適當(dāng)防凍措施，溶劑型抗菌涂料應(yīng)采取防火措施。產(chǎn)品應(yīng)根據(jù)其類型定出貯存期,并在包裝標(biāo)志上明示。
附A
(規(guī)范性附錄)
抗菌涂料一一抗細(xì)菌性能試驗(yàn)方法
A.1 原則
本方法通過定量接種細(xì)菌于待檢驗(yàn)樣板上,用貼膜的方法使細(xì)菌均勻接觸樣板，經(jīng)過一定時(shí)間的培養(yǎng)后,檢測樣板中的活菌數(shù),并計(jì)算出樣板的抗細(xì)菌率。
A.2條件
A.2.1 主要設(shè)備
A.2.1.1 恒溫培養(yǎng)箱(37±1)℃、冷藏箱0℃~5℃、超凈工作臺(tái)、生物光學(xué)顯微鏡、壓力蒸汽滅菌器、電熱干燥箱。
A.2.1.2 滅菌平皿、滅菌試管、滅菌移液管、接種環(huán)、酒精燈。
A.2.2 主要材料
A.2.2.1 覆蓋膜
聚乙烯薄膜,標(biāo)準(zhǔn)尺寸為(40±2)mm×(40±2)mm、厚度為0.05 mm~0.10 mm。用70 %乙醇溶液浸泡10min,再用無菌水沖洗，自然干燥。
A.2.2.2 培養(yǎng)基
A.2.2.2.1 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基(NB)
牛肉膏 5.0g
蛋白陳 10.0 g
氯化鈉 5.0g
制法:取上述成分依次加人1000 ml 蒸留水中，加熱溶解后用0.1 mol/L NaOH 溶液(分析純)調(diào)節(jié) pH 值為 7.0~7.2.分裝后置壓力蒸汽滅菌器內(nèi),121℃滅菌 30min。
A.2.2.2.2 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(NA)
1000 mL營養(yǎng)肉湯(NB)中加入 15 g 瓊脂,加熱化,用0.1mol/L NaOH 溶液調(diào)節(jié) pH值為7.0~72.分裝后置壓力蒸汽滅菌器內(nèi),121C滅菌 30min。
A.2.2.3 試劑
A.2.2.3.1 消毒劑
70 %乙醇溶液
A.2.2.3.2洗脫液
含0.85 % NaCl 的生理鹽水。為便于洗脫可加入 0.2 %無菌表面活性劑(如吐溫 80)。用0.1mol/L NaOH 溶液或0.1mol/L HCl 溶液調(diào)節(jié) pH 值為 7.0~7.2.分裝后置壓力蒸汽滅菌器內(nèi)，121℃滅菌30min。
A.2.2.3.3 培養(yǎng)液
營養(yǎng)肉湯(NB)/ 生理鹽水溶液。建議用于大腸桿菌的培養(yǎng)液濃度為 1/500.金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)液濃度為 1/100.為便于細(xì)菌分散可加人少量無菌表面活性劑(如吐溫 80)。用0.1 mol/L NaOH 溶液或0.1mol/L HCI溶液調(diào)節(jié) pH 值為 7.0~7.2.分裝后置壓力蒸汽滅器內(nèi),121℃滅菌30min。
A.2.3 檢驗(yàn)菌種
金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)AS1.89.
b) 大腸埃希氏菌(Escherichia coli)AS1.90
根據(jù)產(chǎn)品的使用要求,可增加選用其他菌種作為檢驗(yàn)菌種，但菌種應(yīng)由國家級(jí)菌種保藏管理中心提供。
A.2.4 樣品
A.2.4.1 陰性對(duì)照樣品
編號(hào) A,是直徑90mm或100 mm 的滅菌培養(yǎng)平皿的50 mm×50 mm內(nèi)平板。
A.2.4.2 空白對(duì)照樣品
編號(hào) B,是未添加抗菌成分的涂料試板,此對(duì)照涂料樣品要求不含有任何無機(jī)或有機(jī)抗菌劑、防霉劑、防腐劑,可由中國建筑材料科學(xué)研究總院定點(diǎn)供應(yīng)。
A.2.4.3 抗菌涂料試驗(yàn)樣品
編號(hào) C,是添加抗菌成分的涂料試板。
A.2.4.4 涂料試板制備制備試板所用底材通常應(yīng)是實(shí)際使用底材(例如水泥板、木板、金屬板、塑料板、貼膜紙板)。涂料的施涂一般為兩次涂刷,第一遍表干后涂刷第二遍,涂膜厚度濕膜小于 100 μm。試板涂刷后于標(biāo)準(zhǔn)條件下干 7天(夏天南方梅雨季節(jié)要求在空調(diào)條件下干燥 7天),保證試板漆膜完全后再用于實(shí)驗(yàn)。將涂刷好的試板裁成 50 mm×50 mm 大小的試板十片在試驗(yàn)前應(yīng)進(jìn)行消毒,建議用超凈工作臺(tái)中紫外滅菌燈消毒處理試板 5min，備用。
A.3 操作步驟
A.3.1菌種保藏
將菌種接種于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(NA)斜面上,在(37±1)℃下培養(yǎng) 24 h后,在0℃~5℃下保藏(不得超過 1個(gè)月),作為斜面保藏菌。
A.3.2 菌種活化
使用保藏時(shí)間不超過 2 周的菌種,將斜面保藏菌轉(zhuǎn)接到平板營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上,在(37±1)℃下培養(yǎng) 18 h~20 h,試驗(yàn)時(shí)應(yīng)采用連續(xù)轉(zhuǎn)接 2次后的新鮮細(xì)菌培養(yǎng)物(24 h 內(nèi)轉(zhuǎn)接的)。
A.3.3 菌懸液制備
用接種環(huán)從 A.3.2 培養(yǎng)基上取少量(刮1~2環(huán) )新鮮細(xì)菌，計(jì)入培養(yǎng)液中，并依次做 10 倍遞增稀釋液,選擇菌液濃度為(5.0~10.0)X105 cuf/mL 的稀釋液作為試驗(yàn)用菌液,按 GB 4789.2《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測定》的方法操作。
A.3.4 樣品試驗(yàn)
分別取 0.4 mL~0.5 mL試驗(yàn)用菌液(A.3.3)滴加在性對(duì)照樣(A)、空白對(duì)照樣(B)和抗菌涂料樣(C)上。
用滅菌鑷子夾起滅菌覆蓋膜分別覆蓋在樣(A)樣、(B)和樣(C)上一定要鋪平且無氣泡，使菌均勻接觸樣品,置于滅菌平皿中,在(37±1)℃、相對(duì)濕度 RH>90 %條件下培養(yǎng) 24 h。每個(gè)樣品做3個(gè)平行試驗(yàn)。
取出培養(yǎng) 24 h 的樣品,分別加人 20 mL 洗液,反復(fù)樣(A)(B)樣(C)及覆蓋膜(最好用鑷子夾起薄膜沖洗),充分搖勻后,取洗液接種于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(NA)中,在(37±1)℃下培養(yǎng) 24h~48 h后活菌計(jì)數(shù),按 GB 4789.2《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測定》的方法測定洗液中的活菌數(shù)。
A.4檢驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
將以上測定的活菌數(shù)結(jié)果乘以 1000 為樣品 A、樣品 B、樣品 C 培養(yǎng) 24h 后的實(shí)際回收活菌數(shù)值數(shù)值分別為 A,BC,保證試驗(yàn)結(jié)果要滿足以下要求,否則試驗(yàn)無效:
同一空白對(duì)照樣品 B的3個(gè)平行活菌數(shù)值要符合(最高對(duì)數(shù)值一最低對(duì)數(shù)值)/平均活菌數(shù)值對(duì)數(shù)值≤0.3;
樣品 A的實(shí)際回收活菌數(shù)值 A 應(yīng)均不小于 1.0X105 cfu/片,且樣品 B 的實(shí)際回收活菌數(shù)值 B應(yīng)均不小于1.0X104 cfu/片抗細(xì)菌率計(jì)算公式為:
R(%)=(B-C)/BX100%
式中:
R一抗細(xì)菌率(%)，數(shù)值取三位有效數(shù)字;
B一空白對(duì)照樣 24 h后平均回收菌數(shù)(cfu/片);
C一抗菌涂料樣 24 h 后平均回收菌數(shù)(cfu/片);
附 錄 B
(規(guī)范性附錄)
抗菌涂料一抗霉菌性能試驗(yàn)方法
B.1原則
本方法用以測定抗菌涂料在霉菌生長的條件下對(duì)霉菌的抑制作用。
本方法規(guī)定將一定量的孢子懸液噴在待測樣品和培養(yǎng)基上,通過直接觀測長霉程度來評(píng)價(jià)抗菌涂料的長霉等級(jí)。
B.2 條件
B.2.1 主要設(shè)備
B.2.1.1 恒溫恒濕培養(yǎng)箱(28±1)℃和相對(duì)濕度 RH>90 %冷藏箱0℃~10 ℃、超凈工作臺(tái)、離心機(jī)、生物光學(xué)顯微鏡、壓力蒸汽滅菌器、電熱干燥箱。
B.2.1.2 血球計(jì)數(shù)板、滅菌平皿、滅菌試管、滅菌移液管、滅菌離心管、滅菌錐形瓶、接種環(huán)、酒精燈。
B.2.2 主要材料
B.2.2.1 陰性對(duì)照樣品
25 mm×25 mm 無菌濾紙
B.2.2.2 空白對(duì)照樣品
編號(hào) A,是未添加抗菌成分的涂料試板,對(duì)照樣品要求與 A.2.4.2 中要求一致,樣品試板制備參照A.2.4.4 進(jìn)行。
B.2.2.3 抗菌涂料試驗(yàn)樣品
編號(hào)B,是添加抗菌成分的抗菌涂料試板,樣品試板制備參照 A.2.4.4進(jìn)行。
以上 B.2.2.2 和 B.2.2.3 中所有樣品試驗(yàn)前均應(yīng)進(jìn)行消毒,建議用無菌水沖洗,然后用滅菌紫外燈照射滅雜菌 5min。
B.2.3 試劑和培養(yǎng)基
B.2.3.1 營養(yǎng)鹽培養(yǎng)液
硝酸鈉(NaNO3) 2.0g
磷酸二氫鉀(KH2PO4) 0.7g
磷酸氫二鉀(KHPO) 0.3g
氯化鉀(KCI) 0.5g
硫酸鎂(MgSO4·7H2O) 0.5g
硫酸亞鐵(FeSO4·7H20) 0.0lg
蔗糖 5g
制法;取上述成分加入1000 mL 0.05 %潤濕劑水溶液中,加熱溶解后,用0.1mol/L NaOH 溶液調(diào)節(jié) pH 值使滅菌后為 6.0~6.5.分裝后置壓力蒸汽滅菌器內(nèi) 115℃滅菌 30min。
B.2.3.2 營養(yǎng)鹽瓊脂培養(yǎng)基
1000 mL營養(yǎng)鹽培養(yǎng)液中加入 15 g 瓊脂,加熱熔化,用0.1ml/L NaOH 溶液調(diào)節(jié) pH值使滅菌后為 6.0~6.5.分裝后置壓力蒸汽滅菌器內(nèi) 115℃滅菌 30min。
B.2.3.3馬鈴葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)
馬鈴薯用水洗凈,去皮切成小塊。稱取 200 g,加 1000 mL 蒸餾水加熱沸 1h。然后用雙層紗布擠出濾液,將濾液加蒸餾水 1000 mL,加入葡萄糖 20 g,瓊脂20g，加熱熔化，用0.1mol/L NaOH 溶液調(diào)節(jié) pH值使滅菌后為 6.0~6.5.115℃滅菌 30min。
B.2.3.4 試劑
B.2.3.4.1 消毒劑
70 %乙醇溶液
B.2.3.4.2 洗脫液
吐溫 80、N-甲基乙磺酸(N-methyltaurine)和二辛磺化丁二酸鈉(Dioctyl Sodium Sulphosuccinate),以上潤濕劑任選一種,制成含 0.05 %潤濕劑水溶液調(diào)節(jié) pH 值使滅菌后為6.0~6.5.115℃滅菌30min。
B.2.4 檢測菌種
根據(jù)產(chǎn)品的使用要求，可增加選用其他菌種作為檢測菌種,但菌種應(yīng)由國家級(jí)菌種保藏管理中心提供。
B.3操作步驟
B.3.1菌種保藏
將菌種分別接種在馬鈴薯-葡糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)斜面上,在28℃~30℃下培養(yǎng) 7d~14 d 后在5℃~10℃下保藏(不得超過 4 個(gè)月)作為保藏菌
B.3.2 菌種活化
將保藏菌接種在 PDA 斜面培養(yǎng)基試管中,培養(yǎng) 7d~14 d,使生成大量孢子。制備孢子懸液時(shí)不得拔去棉塞。每打開 1 支只供制備 1 次懸液，每次制備孢子懸液必須使用新培養(yǎng)的霉菌孢子。
B.3.3孢子懸液制備
在培養(yǎng) 7d~14 d內(nèi) B.3.2的 PDA 斜面培養(yǎng)基中加人少量菌蒸留水，用菌接種針輕輕刮取表
面的新鮮霉菌孢子,將孢子懸液置于 50 mL 錐形瓶內(nèi)，然后注入 40 mL 洗脫液。
錐形瓶中加入直徑5 mm的玻璃珠 10~15粒與孢子混合，密封后置水浴振蕩器中不斷振蕩使成團(tuán)的孢子散開,然后用單層紗布棉過濾以除去菌絲。將其裝入滅菌離心管中,用離心機(jī)分離沉淀抱子,去上清液。再加入 40 mL 洗脫液，重復(fù)離心操作 3 次。
用營養(yǎng)鹽培養(yǎng)液稀釋孢子懸液,用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，制成濃度為(1×106±2×105)pores/mL的
霉菌孢子懸液。
6種霉菌均用以上方法制成孢子懸液，將 6 種孢子懸液等量混合在一起，充分振蕩使其均勻分散。
混合孢子懸液應(yīng)在當(dāng)天使用,若不在當(dāng)天使用應(yīng)在 3℃~7℃保存,4 日內(nèi)使用。
B.3.4 平板培養(yǎng)基制備
無菌平皿中均勻注入營養(yǎng)鹽瓊脂培養(yǎng)基,厚度3 mm~6 mm,凝固后待用(48 h 內(nèi)使用)。
B.3.5 霉菌活性控制
陰性對(duì)照樣品(無菌濾紙)鋪在平板培養(yǎng)基上,用裝有新制備的混合孢子懸液的噴霧器噴孢子懸液使其充分均勻地噴在培養(yǎng)基和濾紙上。
在溫度 28℃,相對(duì)濕度90 % RH 以上的條件下培養(yǎng)7d，濾紙條上應(yīng)明顯有菌生長,否則試驗(yàn)應(yīng)被認(rèn)為無效，應(yīng)重新進(jìn)行試驗(yàn)。
B.3.6 樣品試驗(yàn)
同時(shí)空白對(duì)照樣品 A、抗菌涂料試板 B 也分別鋪在培養(yǎng)基上,噴孢子懸液,使其充分均勻地噴在培養(yǎng)基和樣品上。每個(gè)樣品做 5 個(gè)平行試驗(yàn)。
以上樣品在溫度28 ℃,相對(duì)濕度 90 % RH 以上的條件下培養(yǎng) 28 d,若樣品長霉面積大于10 %,可提前結(jié)束實(shí)驗(yàn)。
B.4檢驗(yàn)結(jié)果
取出樣品需立即進(jìn)行觀察,空白對(duì)照樣品 A 長霉面積應(yīng)不小于 10 %,否則不能作為該試驗(yàn)的空白對(duì)照樣品。每種樣品 5 個(gè)平行中以3 個(gè)以上同等級(jí)的定為該樣品的長霉等級(jí)。
樣品長霉等級(jí):
0級(jí) 不長，即顯微鏡(放大 50 倍)下觀察未見生長。
1級(jí) 痕跡生長,即肉眼可見生長,但生長覆蓋面積小于 10 %。
2級(jí) 生長覆蓋面積大于 10 %。
抗菌涂料行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《HG/T 3950-2007》完整詳細(xì)版本已為大家奉上，歡迎各位查閱觀看。
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